干细胞因其自我更新能力和多向分化潜能，在再生医学、药物筛选和疾病建模中展现出巨大潜力，干细胞研究的每一次范式革命都始于培养体系的突破，其培养方式直接影响细胞的质量、稳定性及临床应用前景。
图1. 人多能干细胞 （hPSC） 培养基质的演化历程【1】
干细胞传统的黏附培养依赖于小鼠饲养层细胞，存在异源污染、操作复杂和可重复性差等局限性，为解决这些问题，以基质蛋白为基础的无饲养层（Feeder-Free）培养体系应运而生，如层粘连蛋白（Laminin）、玻连蛋白（Vitronectin）和纤连蛋白（Fibronectin），它们可以有效模拟体内微环境，通过整合素介导的黏附作用维持干细胞的贴壁与增殖，为临床级干细胞培养提供更安全、高效、可控的选择。
层粘连蛋白（Laminin）
层粘连蛋白是一种主要存在于基底膜的细胞外基质蛋白，可以调节多能干细胞的自我更新，分化和多能性。Laminin 521（LN-521）已被证明能够有效促进PSCs的贴附，并通过与整合素α6β1相互作用维持细胞的未分化状态【2】。此外，LN-521支持PSCs的单细胞传代，提高细胞存活率，并促进向特定细胞类型的分化。
玻连蛋白（Vitronectin）
玻连蛋白是一种细胞外糖蛋白，可与整合素αvβ5和αvβ1相互作用，促进PSCs的贴附和生长【3】。研究表明，Vitronectin能够替代基质胶（Matrigel），能在不影响 hPSCs 分化潜力的情况下促进其增殖超过 20 次，提供更稳定的培养环境，并减少异源成分的干扰【4】。
纤连蛋白（Fibronectin）
纤连蛋白是广泛分布的一种大分子量细胞外糖蛋白，作为干细胞培养基质时，可以促进细胞生长，提高细胞贴壁率，促进干细胞的自我更新。Fibronectin 和laminin 可在特定的培养体系中促进多能干细胞和间充质干细胞向心肌细胞、胰岛细胞等分化【5，6】，而在PSCs培养中，Fibronectin可以提高细胞存活率，并增强细胞的增殖能力【7】。
重组基质蛋白培养优势
细胞形态均一
在重组基质蛋白（如Laminin-521或Vitronectin）支持下，干细胞可形成均一、致密的克隆结构，表现出良好的细胞间连接性【8】。
维持多能性
基质蛋白培养方式下的PSCs可高表达OCT4、SOX2和NANOG等关键标志物，维持其未分化状态【9】。
高增殖能力
在基质蛋白Laminin-521支持下的细胞增殖水平可与饲养层相媲美，甚至更高【10】。
基因表达稳定
在基质蛋白培养条件下，PSCs的基因表达稳定且接近体内干细胞状态，且应激相关基因表达水平较低【11】。
以重组基质蛋白（如Laminin-521、Vitronectin等）为基础的干细胞培养系统，在确保细胞形态一致性、保持多能性标志物表达、提高扩增效率及基因表达稳定性方面展现出明显优势，并且带来可重复性高、无异源污染风险的安全培养体验。
重组基质蛋白
近岸蛋白提供一系列经验证的重组基质蛋白，满足不同的干细胞培养需求！
产品特点
👉高纯度、高活性、低内毒素
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产品验证数据
高活性重组Vitronectin（GMP）
Measured by its ability to support iPS cell attachment and spreading when used as a substratum for cell culture. The ED50 for this effect is 0.12ug/mL.
高活性重组Laminin521 (GMP)
Measured by its ability to support iPS cell attachment and spreading when used as a substratum for cell culture. The ED50 for this effect is 89 ng/mL.
高活性重组Fibronectin(GMP)
Measured by its ability to support Jurkat cell attachment and spreading when used as a substratum for cell culture.
支持干细胞稳定传代培养
iPSC分别在Vitronectin、Laminin511和Laminin521的支持培养下，进行稳定连续传代培养P1至P5，均可维持良好的生长，细胞形态均一正常。
有效维持细胞干性
Vitronectin、Laminin511和Laminin521培养的iPSC可以有效维持干性相关转录因子的表达。
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参考文献
【1】Villa-Diaz, L. G., Ross, A. M., Lahann, J., & Krebsbach, P. H. (2013). Concise review: the evolution of human pluripotent stem cell culture: from feeder cells to synthetic coatings. Stem cells, 31(1), 1-7.
【2】Rodin, S., Domogatskaya, A., Ström, S., Hansson, E. M., Chien, K. R., Inzunza, J., Hovatta, O., & Tryggvason, K. (2010). Long-term self-renewal of human pluripotent stem cells on human recombinant laminin-511. Nature biotechnology, 28(6), 611–615.
【3】Braam, S. R., Zeinstra, L., Litjens, S., Ward-van Oostwaard, D., van den Brink, S., van Laake, L., Lebrin, F., Kats, P., Hochstenbach, R., Passier, R., Sonnenberg, A., & Mummery, C. L. (2008). Recombinant vitronectin is a functionally defined substrate that supports human embryonic stem cell self-renewal via alphavbeta5 integrin. Stem cells (Dayton, Ohio), 26(9), 2257–2265.
【4】Yap, L. Y., Li, J., Phang, I. Y., Ong, L. T., Ow, J. Z., Goh, J. C., Nurcombe, V., Hobley, J., Choo, A. B., Oh, S. K., Cool, S. M., & Birch, W. R. (2011). Defining a threshold surface density of vitronectin for the stable expansion of human embryonic stem cells. Tissue engineering. Part C, Methods, 17(2), 193–207.
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【11】Stavish, D., Price, C. J., Gelezauskaite, G., Alsehli, H., Leonhard, K. A., Taapken, S. M., McIntire, E. M., Laing, O., James, B. M., Riley, J. J., Zerbib, J., Baker, D., Harding, A. L., Jestice, L. H., Eleveld, T. F., Gillis, A. J. M., Hillenius, S., Looijenga, L. H. J., Gokhale, P. J., Ben-David, U., … Barbaric, I. (2024). Feeder-free culture of human pluripotent stem cells drives MDM4-mediated gain of chromosome 1q. Stem cell reports, 19(8), 1217–1232.